在实验室里，我们常会看到这样的现象，培养细胞时几乎总是添加FBS（胎牛血清）。或许您会问“什么是胎牛血清，它有什么用途？”接下来文章通蔚生物带大家聊聊“FBS”。
为什么要在培养基中添加血清
动物细胞不能单独在培养基中生长，必须补充血清。血清作为激素来源，增强培养基的缓冲作用，并防止酚红和各种蛋白酶的侵害。近年来，许多研究人员致力于寻找血清的替代品，例如无血清培养基和合成培养基。虽然无血清培养基在不断发展，但血清仍然是许多动物细胞培养中不可或缺的一部分。作为科研人员需要根据具体的研究需求选择最合适的培养方法，并根据细胞类型和实验目的来决定是否使用血清或无血清培养基。
为什么经常用胎牛血清
理想情况下，人体细胞使用人血清，小鼠细胞使用小鼠血清，因为同种血清能提供更适合该物种细胞生长的营养和生长因子。然而，由于成本和伦理等原因，这些血清很难获得。在实际应用中，商业细胞培养中经常使用胎牛血清（FBS），因为它富含营养，能够支持多种细胞类型的生长。
什么是胎牛血清？胎牛血清的成分有哪些？
胎牛血清（FBS）是从胎牛的血液中提取的，通常来自胎牛的心脏或脐带。在血液自然凝固后，通过离心去除细胞和血凝块，从而得到血清。血清中保留了血浆中的大部分蛋白质、激素和生长因子，这些成分对于细胞培养至关重要。
虽然胎牛血清已去除细胞和凝血因子，但仍留有许多有助于细胞生长的成分，包括：
1.粘附因子：促进细胞附着到培养基表面，从而提供细胞生长的支撑。
2.生长因子：如表皮生长因子（EGF）、胰岛素样生长因子（IGF）等，刺激细胞分裂和生长。
3.激素：如胰岛素、类固醇激素，调节细胞代谢和功能。
4.脂质：包括脂肪酸和胆固醇，支持细胞膜结构和功能。
5.铺展因子：帮助细胞在培养基表面铺展，促进细胞分裂和扩展。
6.糖类：如葡萄糖，为细胞提供能量。
7.转运蛋白：如白蛋白，帮助运输营养物质和维持细胞渗透压。
5.维生素：如维生素A、维生素D，参与细胞代谢和功能调节。
胎牛血清有什么用途？
在许多领域，细胞培养基的生长被认为非常重要，例如生物技术、疫苗生产、克隆和体外受精。胎牛血清在适当的浓度下使用，可以满足细胞培养物的特定代谢要求，并因其高含量的激素、载体蛋白和大分子蛋白而促进细胞生长。例如胚胎干细胞通过使用胎牛血清转移到培养基中，能够显著促进其生长。
当今市场上的许多疫苗都是使用胎牛血清作为细胞培养基生产的。例如，用于预防病毒的疫苗通常利用胎牛血清进行生产。最近，在生物技术领域进行的一些克隆动物组织的实验中，经常使用胎牛血清。
胎牛血清怎么提取和加工？
就像细胞培养中使用的大多数其他动物血清一样，胎牛血清是由从商业屠宰场收集的血液制成的。胎牛血清生产的第一步是在封闭和隔离的环境中从牛胎儿中采集血液。在屠宰过程中，对牛胎儿进行心脏穿刺，从已宰杀的母牛体内取出胎儿后，通过心脏穿刺抽取血液。血液被冷藏以使其自然凝固。
然后，利用离心机从凝固的血液中去除纤维蛋白凝块和剩余的血细胞，得到澄清的黄色（稻草色）血清。第二步是过滤处理，采用三重无菌0.1微米滤膜的过滤链进行过滤。处理后，灭菌的胎牛血清由信誉良好的商业血清供应商进行严格的质量控制测试。如果血清通过了质量控制测试，则会提供详细的分析证书。
虽然血清采集过程比较简单，虽然过滤孔可以去除真菌和细菌，但它们无法根除病毒。每批都要经过病毒检测，从而使所含的病毒失活，其检测方法如下：
1、热灭活胎牛血清
这是经过上述加热灭活处理的FBS。通过灭活胎牛血清中所含的补体，可以防止培养过程中补体系统激活引起的细胞损伤。另一方面，有些细胞的数据和培养结果可能会因失活而受到影响，所以要慎重考虑。
2、γ-辐照胎牛血清
用伽马射线处理胎牛血清可灭活胎牛血清中的病毒。它可用于存在病毒污染问题的情况，例如再生医学研究。
3、活性炭处理（木炭剥离）FBS
使用活性炭去除激素和脂溶性物质的胎牛血清。它可用于涉及受激素影响的细胞的实验系统。
4、不含四环素的胎牛血清
不含四环素的胎牛血清是指胎牛血清中不含有抗生素四环素（tet）。四环素是一种常用的抗生素，有时会在胎牛血清的生产过程中被添加以防止细菌污染。然而，在某些特定的生物学实验和细胞培养中，四环素可能会干扰实验结果或影响细胞的生长和行为。因此，需要使用不含四环素的胎牛血清。尽管号称“不含”，但由于检测极限，不可能完全去除，但各公司都制定了标准，将含有低于一定标准的四环素的产品作为四环素进行销售。因此，在购买这种血清要留意一下。
5、透析胎牛血清
这是通过分馏处理不含低分子的胎牛血清，其MWCO低于标准MWCO。用于需要考虑低分子物质影响的实验系统。由于透析过程会去除一些低分子量物质，这可能会降低透析胎牛血清对某些细胞系的生长促进能力。因此，在使用透析胎牛血清时，需要根据实验的具体需求和细胞的特性进行选择和调整。
6、外泌体耗尽的FBS
FBS用于与外泌体相关的实验系统。用于需要考虑FBS衍生的外泌体（以及其中包含的核酸）影响的实验系统。因此在使用外泌体耗尽的FBS时，需要根据实验的具体需求和细胞的特性进行选择和调整。
7、ES筛选的FBS
该FBS已被制造商确认可维持ES细胞处于未分化状态。研究人员可以减少自己测试的工作量和成本。
8、IgG耗尽的FBS
由于IgG永远不会被完全去除，因此有时被称为“低IgG”FBS。它用于在抗体生产、蛋白质纯化和需要考虑IgG细胞毒性活性的实验系统过程中培养杂交瘤。
如何保存胎牛血清？
1、储存和保质期
除非标签上另有说明，否则所有胎牛血清产品应储存在-20°C或以下的环境中。研究表明，在这些条件下，血清产品可保存长达五年，而几乎没有或没有有害影响。请勿使用无霜或自动除冰型冰箱，因为这些冰箱的温度波动可能会损害血清的质量。每个产品都贴有储存说明标签。
2、解冻分装
快速解冻胎牛血清产品，优选使用37°C的水浴。玻璃瓶在放入水浴之前应在室温下放置一小时，以免因温度骤变而破裂。请勿反复冷冻和解冻血清产品，这会导致血清中的多种活性成分降解。
有时，血清中可能会出现脂质和/或钙颗粒，这并不意味着血清的无菌性或性能存在问题。建议将血清等分到无菌的冷冻容器中，并重新冷冻，以便在需要时解冻使用。
购买FBS时需要注意的事项
购买FBS时，请注意以下几点：
1.内毒素浓度：
内毒素是细菌细胞壁的成分，过高的内毒素浓度可能会对细胞培养产生不良影响。选择内毒素浓度低的FBS，以确保细胞培养的健康和实验结果的可靠性。
2.血红蛋白浓度：
血红蛋白是红细胞破裂后释放到血清中的成分。较高的血红蛋白浓度可能表明血清的质量较低。选择血红蛋白浓度低的FBS，有助于获得更纯净的培养基。
3.过滤器灭菌时间和过滤器孔径：
过滤器的灭菌时间和孔径直接影响到FBS的无菌性。通常使用0.1微米或0.2微米的过滤器进行无菌过滤，以去除微生物和颗粒。了解过滤过程的详细信息可以帮助确保产品的无菌性。
4.原产地：
不同地区生产的FBS质量可能有所不同。了解产品的原产地，可以帮助评估其质量和可靠性。
胎牛血清的价格主要取决于以上因素。一般来说，内毒素浓度越低、血红蛋白浓度越低、灭菌越彻底，价格越高。产品名称和等级也可能根据质量和处理方式而有所不同。
5.其他考虑因素
供应商的信誉：选择信誉良好的供应商，可以确保产品的质量和一致性。
批次间一致性：了解供应商是否能够提供批次间一致的产品，以确保实验结果的可重复性。
分析证书（CoA）：在购买前索取并查看产品的分析证书，确保其符合实验需求。
通过考虑这些因素，可以选择到高质量的FBS，确保实验的成功和数据的可靠性。
关于原产国，如果是来自大生产商的FBS，我认为没有问题，因为动物在进口前已经经过彻底检查，血清的主要生产地包括：
澳大利亚
新西兰
美国
加拿大
墨西哥
智利
乌拉圭
巴西（*根据地区的不同，无法进口）
哥伦比亚
法国
西班牙
荷兰
通蔚生物胎牛血清，源于优质的胎牛来源，经过严格的筛选和处理，确保每一滴血清都达到最高的质量标准。胎牛血清采用先进的生产工艺，确保血清中的营养成分和生长因子得到最大程度的保留，为细胞提供最优质的生长环境。
通蔚生物胎牛血清都能为您的实验提供稳定的支持。其高浓度的生长因子和丰富的营养成分，有效促进细胞的生长和分化，让您的实验成果更加显著。
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