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品质保证 · 通蔚试剂
021-54845833/15800441009品质保证 · 通蔚试剂
发布时间：2024-04-03 发布作者：上海通蔚
ELISA 代表酶联免疫吸附测定。 ELISA 有多种类型，包括夹心 ELISA、间接 ELISA、直接 ELISA 和竞争ELISA，所有这些都用于检测抗体。那么，为什么 ELISA 三明治检测与流行的午餐菜单项目相关呢？它被称为三明治，因为它使用两种抗体，它们之间结合有抗原（有点像三明治）,不过在常规的叫法中，我们叫它夹心ELISA。请继续阅读，了解有关 ELISA 夹心测定的更多信息、它与其他类型的不同之处以及其过程是什么样的。同时我也会给你介绍一下它能否检测大肠杆菌。关于elisa试剂盒类型，可以参考这篇文章《elisa试剂盒有哪几种类型？elisa四类型图解》
任何 ELISA 都用于发现样本中的目标抗原。然而，在夹心测定中，抗原结合在检测抗体和捕获抗体之间。一般来说，捕获抗体固定在微孔板上。相反，检测抗体（与酶或荧光团标记结合）作为检测前的最后一步应用。与其他 ELISA 类型相比，夹心法更具特异性和敏感性，更适合更复杂的情况。
在大多数情况下，夹心测定过程如下：
1、涂上捕获抗体。表面可以是磁珠或多孔板。孵育后，应清洗未结合的抗体以提高灵敏度。
2、阻止表面上未结合的蛋白质结合面。使用封闭缓冲液，例如牛血清白蛋白 (BSA)、酪蛋白或胎牛血清 (FBS)，有助于减少背景和非特异性结合。
3、添加目标抗原（样品）。首先孵育，使目标抗原能够与捕获抗体结合。然后，洗涤以除去未结合的抗原。
4、添加检测抗体标记结合物。然后，孵育并洗涤。
5、检测。测量吸光度、荧光、显色或化学发光读数。
夹心检测的最大优点是其灵敏度（也称为检测限）。如果您的一抗和二抗对具有高亲和力和特异性，则灵敏度会显着提高。
夹心测定的一个缺点是二抗可能会产生错误的读数，因为一抗和二抗不具有高特异性和亲和力。在这种情况下，二抗可能会与捕获抗体结合，从而给出错误的读数。如果想了解一抗和二抗，可以参考《科研实验必备知识：一抗与二抗的区别》
大肠杆菌是一种细菌，具有特定的抗原决定簇。如果我们可以获得针对这些抗原决定簇的特异性抗体，那么理论上是可以使用夹心法ELISA来检测大肠杆菌的。实际上，已经有研究报道了使用夹心法ELISA来检测大肠杆菌或其相关抗原的方法[1]。
如果你打算进行这方面的研究，建议查阅相关的文献报道，以获取更详细的信息和实验指导。当然也可以咨询我们在线ELISA顾问，我们也可以为您提供这方面的试剂盒检测服务。
参考文献和注释
Kerr P、Chart H、Finlay D 等人。动物和人大肠杆菌O157菌株单克隆夹心ELISA检测方法的建立[J].应用微生物学杂志, 2001, 90(4): 543-549。【谷歌学术】