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猪血凝性脑脊髓炎病毒(Porcine Hemagglultinating Encephalomyelitis Virus，PHEV)属冠状病毒科冠状病毒属。PHEV为不分节段的单股正链RNA病毒，病毒直径120~170 nm。该病毒通常存在于猪的上呼吸道及脑组织中，故病猪及带毒猪为重要的传染源。PHEV主要侵害1～3周龄哺乳仔猪，以仔猪呕吐、衰竭或显著神经症状为主要临床特征，死亡率高达20%～100%，给养猪业造成了严重的经济损失。因此，快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒具有重要的意义。为此，本公司以探针法qRT-PCR技术为基础开发了猪血凝性脑脊髓炎病毒的检测试剂盒，它具有下列特点：
规格及成分
成分
规格
包装
探针法qRT-PCR缓冲液
500μL
0.5mL蓝盖管
探针法qRT-PCR酶混合液v2
50μL
0.5mL红盖管
荧光PCR专用模板稀释液
1mL
1.5mL绿盖管
猪血凝性脑脊髓炎病毒qRT-PCR引物-探针干粉
50次
0.5mL棕色管
猪血凝性脑脊髓炎病毒qRT-PCR阳性对照
(1E7拷贝/μL)
50μL
0.5mL黄盖管
使用手册
1份
1份
本产品采用五孔盒包装
注 意： 引物-探针干粉在使用前需要短暂离心，然后在离心管中加入165μL的超纯水充分混匀后再使用，未用完的需要-20℃保存。
使用方法
稀释标准曲线样品以1E1-1E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。如果需要RNA阳性样品，需要另外订购。
1. 标记6个离心管，分别为6、5、4、3、2、1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，好用带芯枪头，下同）。
3. 在6号管中加入5 μL 1E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样品RNA
低温运输，-20℃保存，有效期2年
