购物车
帮助
021-54845833/15800441009
肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法qLAMP试剂盒
产品及特点
大肠杆菌O104:H4型（Escherichia coli O104:H4）是肠出血性（Enterohemorrhagic）大肠杆菌的一个菌株，但它有部分肠聚集性大肠杆菌（Enteroaggregative）基因。该菌株导致了2011年O104:H4型大肠杆菌疫情，它分泌的毒素可损伤肠道黏膜，甚至进入血液中破坏红血球，导致溶血性病变，这种症状在肾脏中明显，常导致急性肾衰竭，即为溶血性尿毒综合症，因此对大肠杆菌O104:H4型的快速准确鉴定具有重要意义。为此本公司根据独有的探针法LMAP技术，开发了简单快捷的大肠杆菌O104:H4型LAMP检测试剂盒，它具有下列特点：
产品及特点
大肠杆菌O104:H4型（Escherichia coli O104:H4）是肠出血性（Enterohemorrhagic）大肠杆菌的一个菌株，但它有部分肠聚集性大肠杆菌（Enteroaggregative）基因。该菌株导致了2011年O104:H4型大肠杆菌疫情，它分泌的毒素可损伤肠道黏膜，甚至进入血液中破坏红血球，导致溶血性病变，这种症状在肾脏中明显，常导致急性肾衰竭，即为溶血性尿毒综合症，因此对大肠杆菌O104:H4型的快速准确鉴定具有重要意义。为此本公司根据独有的探针法LMAP技术，开发了简单快捷的大肠杆菌O104:H4型LAMP检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供DNA样品。
2. 恒温扩增，简单快捷。
3. 含荧光探针，扩增的专一性比染料法和电泳法更强。
4. 检测灵敏性一般比PCR高10倍以上。
5. 一般30分钟内出结果，比PCR快。
6. 引物根据大肠杆菌O104:H4型基因组的保守区设计，不会跟其他生物的DNA发生交叉反应。
7. 上样量大，对20 μL的反应体系，样品加样量高达到14 μL。
8. 内含的dUTP-UNG可防交叉污染。
9. 提供无传染性的阳性对照，便于分析实验结果。
10. 本产品只能用于定性分析，不推荐用于定量分析。
11. 本产品足够50次20 μL体系的探针法LAMP扩增。
12. 只可用于科研。
规格及成分
|
成分 |
规格 |
包装 |
|
4×LAMP MasterMix （探针法，待加酶） |
200μL |
0.5mL绿盖管 |
|
Bst DNA聚合酶2.0 |
50μL |
0.5mL红盖管 |
|
20×大肠杆菌O104:H4型LAMP引物-探针混合液干粉 |
50次 |
0.5mL白盖管 |
|
大肠杆菌O104:H4型LAMP阳性对照（1×10E4拷贝/μL） |
250μL |
0.5mL黄盖管 |
|
超纯水 |
1mL |
1.5mL蓝盖管 |
|
使用手册 |
1份 |
无 |
|
注 意：使用前请在20×大肠杆菌O104:H4型LAMP引物-探针混合液干粉中加入55μL超纯水， 涡旋震荡半分钟溶解。没用完的需要放-20℃保存。 |
||
|
本产品采用5孔盒包装 |
||
使用方法
样品DNA的制备
样品DNA的制备
1. 用自选方法纯化样品DNA，本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼容，包括本公司的免提取的核酸释放剂。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个样品制备，包括一个样品制备阳性对照（PC）和一个样品制备阴性对照（NC）。PC用10μL本试剂盒提供的阳性对照（1×10E4拷贝/μL）加一定量的水作为样品制备PC，加水后的总体积跟所用核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一致。NC用水替代。。
LAMP反应20μL体系
3. 反应设置：第一次使用时请把所有Bst DNA聚合酶2.0（50μL，本试剂盒提供）加入到 4×LAMP MasterMix（探针法，待加酶）中，轻柔颠倒 20 次充分混匀，然后再取用。如果有N+2个DNA纯化样品，则设置N+4个LAMP扩增，增加LAMP扩增阳性对照和LAMP扩增阴性对照各1个。
4. 置于荧光定量PCR仪中65℃保温60分钟进行扩增，每分钟在FAM通道采集一次荧光信号。
结果分析
结果分析
5. 样品制备阳性对照和LAMP阳性对照的反应液将有标准的S扩增曲线，样品制备阴性对照和LAMP阴性对照的反应液将没呈平线，没有S曲线，否则提取实验或扩增实验无效。如果阳性和阴性对照结果正常，则实验有效，可以分析样品的情况。样品管的荧光曲线为S型，则说明样品为阳性，如果为平线则说明待测样品为阴性。典型的荧光检测结果见下图。左边为阳性，右边为阴性。
自备试剂
待测样品
待测样品
运输及保存
低温运输，-20℃保存，有效期1年
低温运输，-20℃保存，有效期1年
