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021-54845833/15800441009
消退素E1（Resolvin E1，简称RvE1）是一种由ω-3多不饱和脂肪酸二十碳五烯酸（EPA）代谢生成的脂质介质，具有显著的抗炎和促炎症消退作用，RvE1在人体内主要通过局部炎症环境中的酶促反应生成，并在多种疾病模型中显示出其抗炎和修复功能。
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上，捕获样品及标准品中的待测物RvE1，清洗后，再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗，形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物，随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育，待孵育结束后清洗，接着加入TMB显色后，若样本中有待测物则显蓝色，加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去，用酶标仪在450 nm处测OD值，颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比，通过绘制标准曲线计算出样本中RvE1的浓度。
样品收集后若在 1 周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃（1个月内检测），或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融，标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
标准品配置
试剂盒中取出标准品，准备7个试管，先从160ng/mL标准品（200μL）按需吸取一定量用1×稀释液稀释至8ng/mL（例：50μL的标准品母液+950μL的1×稀释液，制备得到1000μL的8ng/mL浓度标准品），随后在6个试管中分别加入500μL的1×稀释液，在这6个单独的试管中将8ng/mL标准品依次2倍倍比稀释至6个梯度，共配制7个浓度的标准品，依次为: 8ng/mL、 4ng/mL、 2ng/mL、 1ng/mL、 0.5ng/mL、 0.25ng/mL、 0.125ng/mL，从最高浓度标准品溶液中吸取500μL标准品到下一个试管中，轻轻吹打混匀，以此类推进行标准品的倍比稀释（如图所示），1×稀释液用作零浓度标准品(0ng/mL)。
|
标准品浓度(ng/mL) |
8 |
4 |
2 |
1 |
0.5 |
0.25 |
0.125 |
0 |
|
OD值 |
2.403 |
1.748 |
0.989 |
0.602 |
0.36 |
0.239 |
0.167 |
0.071 |
|
校正OD值 |
2.332 |
1.677 |
0.918 |
0.531 |
0.289 |
0.168 |
0.096 |
0 |
下图所示标准曲线仅供示例，结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果
重复性
板内变异系数小于10%，板间变异系数小于10%。
灵敏度
经样本测试，本试剂盒的检测灵敏度为0.06ng/mL。
特异性
该试剂盒测定可识别重组人RvE1。
其他相关蛋白在稀释缓冲液中制备为50ng/mL，并测定交叉反应性。没有观察到明显的交叉反应。
